Анализ анаболических стероидов методом ГХ-МС/МС


Использование анаболических стероидов атлетами в качестве допинга строго запрещено Международным олимпийским комитетом, национальными и международными спортивными федерациями. Факт идентификации анаболических стероидов и их главных метаболитов в моче спротсменов рассматривается как серьезное нарушение и, следовательно, ответственность аналитической лаборатории, выполняющей подобные анализы весьма высока. Это означает, что анализ должен иметь абсолютную достоверность и быть подтвержденным невызывающим никаких сомнений методом. Для достоверной идентификации и достижения низких порогов обнаружения анаболических стероидов в столь сложных матрицах, какими являются физиологические жидкости, необходим высокочувствительный и высокоселективный метод. В связи с этим медицинская комиссия международного олимпийского комитета обязала аккредитованные ею лаборатории выполнять анализы либо методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения, либо с использованием тандемной масс-спектрометрии (МС/МС).

Использование ГХ/МСn системы POLARIS обеспечивает как высокую чувствительность, так и однозначную достоверную идентификацию искомых соединений, что достигается как абстрагированием от химического шума (при анализе образцов, представляющих собой сложные матрицы органических соединений, фоновый спектр характеризуется наличием пиков практически на каждой массе) так и возможностью идентификации по полному масс-спектру дочерних ионов каждого искомого соединения.

В таблице суммированы данные анализа 19 стероидов (и их основных метаболитов) с указанием родительского иона, от которого был получен дочерний МС/МС спектр. МС/МС спектры позволяют проводить сравнение по методу «отпечатков пальцев» с масс-спектрами библиотек, созданных пользователем, однозначно проводить идентификацию и количественный анализ с использованием стандарта. Предел обнаружения для данного метода составляет менее 1 нг/мл (1 пг/мкл).

 

Анаболический андрогенный стероид (* основной метаболит)

Родительский ион, m/z а.е.м.

Основной характеристический ион в МС/МС спектре, m/z а.е.м.

Боластерон-М*
Болденон
Болденон-М*
Дромостанолон-М*
Флюоксиместерон-М*
6 b-OH-метандиенон
Метилтестостерон-М1*
Метилтестостерон-М2*
Местеролон-М*
Метенолон-М*
17 эпиметандиенон
Эпиметендиол
Миболерон
Нандролон М1*
Нандролон М2*
Оксандролон
Оксиместерон
3′ OH-станозолол
Тестостерон

284
430
432
448
462
517
435
435
448
446
444
358
446
420
420
363
534
545
432
269
206
194
343
357
229
255
255
433
431
206
301
431
405
405
273
443
455
417

 

Анализ тестостерона представляет собой дополнительный вызов для аналитики. Тестостерон — это мужской гормон и естественное содержание тестостерона и его метаболитов в организме человека может быть относительно высоким. Отличить химически естественный тестостерон от введенного искусственно невозможно! Изотопная масс-спектрометрия предлагает метод способный отличить естественный тестостерон от введенного в организм человека.