Анализ ТНС в крови методом ГХ-МС/МС


Психоактивным компонентом наркотического вещества марихуана является D9-тетрагидроканнабинол (ТНС). Это вещество очень быстро метаболирует в организме человека. Обычно детектирование использования человеком марихуаны проводится по метаболиту, присутствующему в моче — карбокси-D9-тетрагидроканнабинолу. Однако, в таких случаях как, например, расследование дорожных проишествий с фатальным исходом необходимо в короткое время определить и измерить концентрацию ТНС в крови. Поскольку наиболее высокая концентрация ТНС в крови наблюдается во время курения марихуаны и в течение двух часов после этого падает до 10 нг/мл, необходимо иметь строго достоверный и высокочувствительный метод анализа ТНС в крови.

Метод тандемной масс-спектрометрии (МС/МС) позволяет весьма эффективно улучшать характеристики селективности, снижать затраты времени и увеличивать достоверность анализа, достигать необходимой чувствительности.
Анализ ТНС из крови ыполняется на ГХ/МСn системе POLARIS при следующих условиях:
1. Пробоподготовка. 1 мл образца крови разбавляется 4 мл деионизованной воды, центрифугируется для удаления нерастворенного осадка. Если необходимо выполнять строгий количественный анализ, на этой стадии добавляется в качестве стандарта ТНС-d3 аналог (дейтерированный D9-ТНС) в концентрации 0,1-10 мг/мл. Проводится твердофазная экстракция на С18 картридже. Концентрированные экстракты дериватизируются для получения триметилсилильных производных с целью улучшения хроматографического разделения.
2. Хроматографические условия. Колонка DB-5 20 м, 0.18 мм, 0.18 мкм толщина фазы. Температурная программа 100оС -15оС/мин-300оС, изотерма 20 мин при 300оС. Ввод образца 1 мкл без сброса, температура инжектора 200оC) 40 см/сек.
3. Масс-спектрометрический детектор. Ионизация электронным ударом, скорость сканирования 0.5 сек, в качетсве родительского иона для МС/МС выбирается M+, соответствующий 386 а.е.м. для TMS-THC, 374 а.е.м. для TMS-THC-d3. Использование такой методики анализа позволяет провести однозначную идентификацию искомого соединения и достигнуть предела обнаружения менее чем 1 нг/мл.

 

Масс-спектр дочерних ионов (МС/МС) из молекулярного иона m/z 386 а.е.м. триметилсиллильной производной D9-ТНС